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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)

Co-IP:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學原理來研究蛋白質相互作用的經(jīng)典

實驗方法，它可以確定兩種蛋白在完整細胞內生理條件下是否存在相互作用。

原理：

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。

優(yōu)點為：

（1）相互作用的蛋白質都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復合物。

缺點為：

（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；

（2）兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實驗前預測目的蛋白是什么，以選擇后檢測的抗體，所以，若預測不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有冒險性。

免疫共沉淀（Co-IP）實驗?步驟：

1.試劑準備，樣品收集

2.免疫沉淀反應后，在進行電泳

3.通過免疫共沉淀確定結合蛋白

免疫共沉淀（Co-IP）實驗?結果展示：

實驗周期及交付標準

1.實驗周期: 2-5周

2.交付標準: WB顯色圖、原始膠片、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)

需確認的信息

1.樣本種屬及類型

2.目的蛋白及ID號

3.是否提供--抗

4.樣本數(shù)量及分組信息

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